Экстракционно-спектрофотометрическое определение оксациллина с родаминовым красителем - родамином 6Ж

Родаминовые или ксантеновые красители представляют другой ряд основных органических красителей. Представителями этого ряда красителей являются этил-родамин, бутил-родамин, родамин С, родамин 6Ж и т.д. По литературным данным известно что, при использовании родаминовых или ксантеновых красителей чувствительность определения заметно повышается, особенно когда в образовании ионного ассоциата (ИА) участвует более устойчивый анион. С другой стороны известно так же, что при использовании родаминовых красителей воспроизводимость резултатов ниже. Из выше цити-руемых родаминовых красителей более высокие воспроизводимые резуль-таты обеспечиваются при использовании родамина 6Ж.

Учитывая вышеизложенное мы намеренны были разработать новый экстракционно-спектрофотометрический метод определения микрограммовых количеств оксациллина из ряда антибиотиков –бензилпенициллина содержащее во внутренней структуре b - лактамное кольцо. В литературе мы не нашли аналогичное сообщение. Таким образом родамина 6Ж для этой цели применяется впервые.

Формула реагента красителя родамина 6Ж (R6Ж).

Для количественного определения микрограммовых колличеств оксациллина ранее нами впервые разработаны новые экстракционно-спектрофо-тометрическиe методы определения с использованием красителя диазинового ряда сафранина “Т”(СТ) [1] и акридинового красителя акридинового жел-того [2-3]. При помощи этих методик можно успешно определить оксациллин в лекарственных препаратах.

Таким образом, настоящее исследование посвящено разработке нового экстракционно-спектрофотометрического метода определения малых колличеств оксациллина органическим основным красителем родаминого ряда родамином 6Ж (R 6Ж). Предварительними опытами проведенными нами было установлено, что анион оксациллина с катионом родамина 6Ж образует ионный ассоциат красного цвета.

Экспериментальная часть

Методика эксперимента. Запасной раствор оксациллина (натриевая соль) готовили растворением точной навески препарата производство фирмы “Киев мед.препарат” (Украина) в дистиллированной воде. Рабочие растворы оксациллина готовили ежедневно соответствующим разбавлением исходного запасного-раствора. Водный раствор родамина 6Ж 0,025% готовили растворением точной навески реагента-красителя (квалификации чда) в дистиллированной воде и отфильтровали. Органичес-кие растворители (квалификации хч и чда) использовались без дополнитель-ной очистки.

Равновесные значение PH водных фаз контролировали при помощи PH –метра PH -121. Оптическую плoтность (ОП) водных растворов и органических экстрактов измеряли спектрофотометром СФ-16. Предварительными опытами было установлено, что анион оксациллина с катионом красителя R6Ж образует ионный ассоциат (ИА) красного цвета. Экстракцию проводили в делительных воронках объемом 50 мл.

Оптимальные условия образования и экстракции ИА были исследованы так: в качестве экстрагентов были испытаны различные растворители и их смеси: донорно-активные или их смеси с инертными растворителями, а так же инертные или их смеси растворителями с высокой диэлектрической проницаемостью и малой сольватирующей способностью. Наиболее эффективным экстрагентом для извлечения образующегося соединения ИА оказалось бинарная смесь дихлорэтан (ДХЭ) + четырехлористый углерод (CCI4), (1:1), (2,5мл + 2,5мл), который обеспечивает максимальный полезный аналитический сигнал экстракта ИА, при минимальном фоновом значении (Ахол=0.08). Значение Ахол зависит от чистоты ДХЭ-а. Обьемное соотношение водной и органических фаз составляет 2:1(10мл+5мл), Были сняты спектры светопоглощения экстрактов образующегося ИА-а, ,,холостых,, экстрактов и водных растворов красителя.

Во всех случаях максимум светопоглощения наблюдается при одной и той же длине волны λ=525нм. При установлении оптимальной кислотности водной фазы опыти проводили в широком интервале кислотности от PH=1,0-5,0 и 0,25-1,0N по HCI, а также PH= 5,6-5,8 по дистиллированной воде. Установленно, что максимальное извлечение образующегося соединения ОП экстракта ИА, наблюдается при PH=5,6-5,8 по дистиллированной воде. При высоких значениях кислотности наблюдается понижение значения ОП экстракта ИА. Таким образом, при низких значениях кислотности водной фазы экстракция протекает лучше, т.к. при повышении PH повышается значение ОП образующегося экстракта ИА. Количественное извлечение ИА в органическую фазу имеет место, при добавление в водную фазу 1.0-1.4 мл 0,025% раствора R6Ж. Образующийся ИА оксациллина R6Ж переходит из водной фазы в органическую при однократной экстракции в течение одной минуты, из PH 5,6-5,8 по дистиллированной воды. ОП органических экстрактов ИА остается не изменной в течении более трех часов. 

Методом повторной экстракции был определен фактор извлечения (R=94%). Диапазон определяемой концентрации оксациллина составляет 5,0мкг -150 мкг /10 мл водной фазы. 

Средное значение кажущегося коэффициента молярного светапоглощения составляет e525= 7∙104 л. мол-1, см-1. 

Мольное соотношение между анионом оксациллина и катионом кра-сителя в образующемся ИА было определено методом прямой линий Асмуса [4] и оказалось равным 1:1. 

Реакция взаимодействия и образование идет по уравнению:

R+CI+OXAC-Na+ = R+ OXAC-+ NaCI

где R+CI- молекула родамина 6Ж, а OXAC- Na+ натриевая соль препарата оксациллина.

Таким образом разработана новая экспрессная экстракционно-спектрофотометрическая методика для колличественного определения оксациллина. Как видно из данных разработанная методика обеспечивает довольно высокое значение молярного коэффициента светопоглащения (e525= 7∙104 л. мол-1, см-1). Это совпадает с литературными данными, где отмечается, что родаминовые красители отличаются от других основных красителей тем, что обеспечивают довольно высокое значение чувствительности.

Разработанная методика успешно применяется для определения оксациллина в лекарственных препаратах.

Литература

1. Н.О. Геокчян, А. А. Егиазариян, Дж. А. Микаелян, А. Г. Хачатрян // ДНАН РА, 2002, т.102, N4, стр. 330-334 
2. Н.О. Геокчян, А. А. Егиазариян // Вестник хирургии Армении имени Г.С.Тамазяна, 2009, N1 (66), стр. 30-37.
3. Геокчян Н.О., Егиазариян А. А., Арутюнян М. Г., Микаелян Дж. А. Экстракционно-абсорбцио-метрическое методы определение родия (III), иридия (IV), осмия (IV), палладия (II), платины (IV) и антибиотиков с органическими основными красителями. Международная конференция по химии и химической технологии, стр 408-411. 13-17 сентября 2010г., Ереван.
4. Булатов М. И., Калинкин И.П., Практическое рукаводство по фотометрическим и спектрофото-метрическим методам анализа. Изд. Химия, Ленинградское отд., 1976, стр. 219. 

Вопросы, ответы, комментарии