Определение ампициллина в лекарственных препаратах основными красителями различных классов экстракционно-спектрофотометрическим методом

Антибиотики – химическое соединение биологического происхождения. Для определения микрограммовых количеств ампициллина (натриевая соль) ранее нами были применены основные красители различных классов оксази – нильский синий “Б” [1], диазинового – сафранин “Т” [2], и акридинового рядов, акридиновый желтый [3].

Формулы красителей:

Нильский синий “Б” (1)	Сафранин “Т” (2)	Акридиновый желтый

Как видно из приведенных формул реагентов, нильский синий “Б”, содержит в своей внутренней структуре гетероатомы азота и кислорода в бензольном кольце, сафранин “Т” два атома азота и акридиновый желтый – один атом азота.

Все три красителя применялись для этой цели впервые. Предварительными опытами было установлено, что анион ампициллина (натриевая соль) с катионами красителей образует новое соединение под названием ионный ассоциат (ИА), который переходит из водной фазы в органическую различными органическими растворителями. И это дало нам возможность разработать новые, экспрессные, эффективные, воспроизводимые, избирательные экстракционноабсорбциометрические методы определения малых количеств антибиотика – ампициллина в лекарственных препаратах.

В настоящем сообщении приведена сравнительная характеристика разработанных методик с использованием аналитических параметров, полученных ИА, разработанных этим методом.

Полученные данные приведены  в таблице. 

Таблица

Характеристика реагентовкрасителей и их соединений с ампициллинионом (основные экспериментальные данные по экстракционноспектрофотометрическому определению ампициллина)

Экспериментальная часть: Запасной раствор ампициллина (натриевая соль) готовили растворением точной навески препарата производства фирмы ОАО “Киевмедпрепарат” (Украина). Разбавлением исходного запасного раствора, ежедневно получали рабочие растворы ампициллина требуемой концентрации.

Водные растворы красителей готовили растворением точной навески красителей (квалификации ч.д.а.) в дистиллированной воде и отфильтровывали. Органические растворители квалификации ч.д.а. и х.ч. использовались без дополнительной очистки. 

Равновесные значения pH водных фаз контролировали при помощи милливольтметра pH–121. Оптическую плотность (ОП) водных растворов и органических экстрактов измеряли на спектрофотометре СФ16. Экстракцию проводили в делительных воронках объемом 50 мл. Экстракционное равновесие достигается в течение одной минуты. Полученные данные приведены в таблице.

Из таблицы следует, что все исследованные реагенты оказались реакционноспособными по отношению к ампициллинаниону в слабокислой среде (pH=1,0 по HCl), образуя ИА. Были сняты спектры светопоглощения органических экстрактов образующегося ИА и “холостых”, а также водных растворов красителей. Во всех трех случаях для трех красителей максимумы светопоглощения наблюдается (λmax) при одной и той же длине волны соответственно. Результаты приведены в таблице. При сопоставлении спектров поглощения водных растворов красителей со спектрами их органических экстрактов четко видно, что в образовании ИА принимает участие однопротонированная форма красителей, и поэтому состав всех изученных ионных ассоциатов равен 1:1, т.е. стехиометрическое отношение ампициллин аниона к катионам красителей равно 1:1, что было установлено методом прямой линии Асмуса [4].

Как видно из таблицы, диапазон определяемой концентрации ампициллина с этими красителями имеет широкий интервал. Из таблицы видно, что высокое значение чувствительности обеспечивает сафранин “Т” – представитель диазинового ряда. 

По литературным данным, второй атом азота (СФ ”Т”) увеличивает интенсивность окраски экстракта ИА. Самое низкое значение коэффициента молярного светопоглощения имеет акридиновый желтый (АЖ). Это, скорее всего, объясняется тем, что АЖ в своей структуре в бензольных кольцах содержит две гидрофильные, а не гидрофобные группы –NH2–, которые мешают растворимости образующегося соединения ИА в органическую фазу и от этого понижается интенсивность окраски экстрактов ИА. Поэтому АЖ имеет низкую чувствительность, однако обеспечивает довольно воспроизводимые результаты, что характерно для акридиновых красителей. 

Таким образом, можно сделать количественное определение ампициллина с помощью трех различных классов органических основных красителей в тех же лекарственных пробах и сравнить полученные данные друг с другом.

Используя эти данные, можно судить о фальсификации препарата и о производителе, что является большой проблемой в мировом масштабе, т.к, разработка новых таких экспрессных методов аналитического контроля фармацевтического препарата является достаточно важной и актуальной задачей.

Литература

1. Геокчян Н.О., Егиазарян А.А., Микаелян Дж.А., Хачатрян А.Г. // Ученые записки ЕГУ, 2002, № 3, с. 61–65.
2. Геокчян Н.О. Вестник хирургии Армении, 2010, 1(70), с. 65–68.
3. Геокчян Н.О. Вестник хирургии Армении, 2011, 2(71), с. 109–113.
4. Булатов М.И., Калинкин И.П. Практическое руководство по фото¬метри¬ческим и спектрофотометрическим методам анализа. Л.: Издво Химия, 1976, с. 219.

Вопросы, ответы, комментарии