Med-Practic
Посвящается выдающемуся педагогу Григору Шагяну

События

Анонс

У нас в гостях

Aктуальная тема

 

Медицинский Вестник Эребуни 1-4.2006 (25-28)

Выявление действия кофеина и аминобактерина на структуру ДНК клеток лимфоцитов человека с применением метода хроматографии

Клюечвые слова: кофеин, однонитевые разрывы ДНК, аминобактерин, репарация ДНК

В окружающей среде, наряду с мутагенами и канцерогенами, присутствует большое число модификаторов, часть которых не способна вызывать мутаций. Однако они могут существенно усиливать мутагенную активность других химических соединений, либо изменять протекание процессов мутагенеза, вызванного факторами физической, химической или биологической природы. Исследование проблемы сочетанного действия различных по механизму воздействия соединений на генетический материал представляет несомненный интерес.

 

Одним из эффективных модификаторов мутагенеза является кофеин – ингибитор процесса репарации ДНК клетки. Особенно интересны данные о совместном воздействии кофеина с мутагенами различной природы [1,7,8].

 

Главным событием в процессе индукции цитогенетических повреждений можно считать возникновение однонитевых разрывов ДНК. Известно, что вероятность образования вторичных повреждений генетического материала из первичных повреждений ДНК в результате процессов репликации и репарации зависит от ряда факторов, таких как типы повреждения ДНК, механизмы их восстановления, фаза клеточного цикла и способность клеток к репарации ДНК.

 

Целью настоящей работы являлось изучение влияния кофеина и (аминобактерина) АМБ (промежуточного продукта синтеза лизина) на уровень однонитевых ДНК и анализ эффективности репарации индуцируемых повреженний. Ранее проводился цитогенетический анализ эффекта кофеина и АМБ на лимфоциты периферической крови человека [1–3,5,6].

 

Материал и методика. Вещества вводили в разных часах культивирования на 2 часа. Для определения репарации повреждений ДНК клетки после обработки веществами отмывали и дополнительно инкубировали в свежей среде в течение 2 часов.

 

Для определения однонитевых разрывов ДНК (ОР) методом хроматографии на клетках с (гидроксиапатитом) ГАП клетки метили 3H-тимидином в течение 22 часов. Метка вводилась в концентрации 1,3 –1,5 мкК/мл на 20-м часу инкубации.

 

Определение возникновения ОР в ДНК проводили методом хроматографии клеточных лизатов на колонках с гидроксиапатитом [4].

 

Увеличение доли однонитевой фракции ДНК свидетельствует о повреждающем действии химического соединения на ДНК, а восстановление двунитевой ДНК до контрольного уровня при постинкубации клеток в свежей среде свидетельствует о репарации разрывов ДНК.

 

Результаты и обсуждение. Было показано, что одноразовая обработка лимфоцитов периферической крови человека кофеином на различных часах культивирования не повышала уровень ОР в ДНК клеток (p>0,05). Однако повторная обработка клеток кофеином (за 24 часа до начала культивирования и на 46-м часу культивирования) вызывала достоверное увеличение количества ОР в ДНК (p>0,05) (табл.).

 

Таблица. Действие кофеина (K) и аминобактерина (АМБ) на ДНК лимфоцитов на разные сроки введения и восстановление повреждений за 2 часа постинкубации (% двунитевой ДНК от суммарной)

Соединение

Кофеин

АМБ

Контроль

Время введения соединений в часах

-24

28

46

70

-24

46

28

46

70

дейст.

репар.

дейст.

репар.

дейст.

репар.

дейст.

репар.

дейст.

репар.

дейст.

репар.

 

 

 

 

85

90

85

89

86

92

85

85

82

88

81

82

95

95

87

К(-24)

-

-

83

86

80

85

86

87

-

-

87

92

-

-

-

АМБ(-24)

86

88

80

84

69

79

67

83

-

-

88

93

-

-

-

 

Изучение эффектов АМБ на ДНК лимфоцитов показало, что АМБ можно отнести к веществам со слабой ДНК-повреждающей активностью. Так, инкубация культивируемых лимфоцитов с АМБ за 24 часа до начала культивирования не вызывала индукцию ОР (р>0,05), а в варианте с введением АМБ на 46-м часу повышала уровень ОР ДНК (р<0,05). Однако повреждения ДНК, зарегистрированные в последнем случае, репарировались за 2 часа постинкубации в свежей среде. В то же время результаты обработки культур лимфоцитов за 24 часа и потом на 46-м часу культивирования позволяют говорить об адаптации клеток к действию АМБ: наблюдалось уменьшение уровня ОР ДНК. По-видимому, этот эффект можно объяснить тем, что после первой обработки мутагеном активность репарационных систем повышается, что усиливает эффективность их работы.

 

То обстоятельство, что АМБ проявил себя как слабый мутаген, а для кофеина в ряде исследований установлен сенсибилизирующий эффект, вызывало закономерный интерес к изучению их комбинированного действия. При этом, кофеин вводился в 4 срока: за 24 часа до культивирования, на 28, 46 и 70-м часах культивирования, а АМБ – за 24 часа до культивирования и на 46-м часу культивирования.

 

Нами показано, что постобработка кофеином лимфоцитов периферической крови, подвергнутых обработке АМБ за 24 часа до начала культивирования, индуцировала усиление ДНК-повреждающего эффекта АМБ, в случае введения кофеина в культуру на 46 и 70-м часах (р<0.05). В то же время не установлен аналогичный эффект при постобработке кофеином на 28-м часу культивирования (р>0,05). Полученные данные о сенсибилизирующем эффекте кофеина согласуются с результатами цитогенетического исследования [2,3,5,6], что свидетельстует о роли однонитевых разрывов в индукции аберрации хромосом при действии слабых мутагенов.

 

По всей видимости, исходя из наших результатов и данных литературы, можно заключить, что кофеин нарушает правильность или скорость репаративных процессов клетки, что отражается в увеличении кластогенной активности тестируемых веществ.

 

Литература


  1. Арутюнян Р.М., Залинян Г.Г. Цитология и генетика, 1987, т. 21, 2, с. 101-105.
  2. Арутюнян Р.М., Залинян Г.Г., Киракосян А.Г. Ж., Агропром: наука и производство, 1992, 11-12¸ с. 20-25.
  3. Арутюнян Р.М., Залинян Г.Г., Киракосян А.Г. Ж., Вестник сельскохозяйственных наук, 1993, 1-2, с. 106-111.
  4. Арутюнян Р.М., Абрамян Л.Г., Саркисян Засухина Т.Ф., Середин Г.Д., Дурнев А.Д. Биолог. жур. Армении, 1990, 9(43), с. 733-738.
  5. Киракосян А.Г., Арутюнян Р.М., Залинян Г.Г. Биолог. журнал Армении, 1997, 3,4, с. 279.
  6. Киракосян А.Г., Арутюнян Р.М., Залинян Г.Г. Биолог. журнал Армении, 1998, 3, с. 228.
  7. Kihlman B.A., Hansson K., Palitti F., Andersson H.C., Hartley-Asp B. Progress in Mutat. Res., 1982, vol. 4, p. 11-24.
  8. Kihlman B.A., Hansson K., Andersson H.C. Mutat. Res., 1982, vol.104, 4-5, p. 323-330.

 

Автор. А.Г. Киракосян, Г.Г. Залинян, Г.Г. Парсаданян Ереванский государственный университет, лаборатория общей биологии
Источник. Научно-Практический Медицинский Журнал “Медицинский вестник Эребуни”, 2.2006 (26), УДК 576.3.088
Информация. med-practic.com
Авторские права на статью (при отметке другого источника - электронной версии) принадлежат сайту www.med-practic.com
Share |

Вопросы, ответы, комментарии

Читайте также

Результаты собственного опыта проведения перкутанных нефролитотрипсий при коралловидном нефролитиазе

Ключевые слова: коралловидный нефролитиаз, перкутанная нефролитотрипсия

Лечение пациентов с коралловидным нефролитиазом является одной из наиболее трудоемких задач урологии. Длительное время исключительной монополией лечения данной категории пациентов обладали только открытые хирургические вмешательства, что не могло не бросить вызов урологам для создания и внедрения менее инвазивных, но не менее эффективных методов лечения...

HLA и болезни

Ключевые слова: доброкачественная гиперплазия простаты, маркеры, HLA - антигены

Учение о гистосовместимости человека в клиническом отношении первоначально разрабатывалось исключительно в рамках трансплантологии [1]. Исследования последнего десятилетия показали, что гены, кодирующие антигены гистосовместимости, являются многофункциональными, то есть клиническое значение их не ограничивается рамками трансплантологии, а связано также с предрасположенностью к определенным заболеваниям...

Гидратация и дегидратация тканей жизнеобеспечивающих органов белых мышей в острых наблюдениях и в результате курсового пребывания в пещере-здравнице

Ключевые слова: спелеотерапия, гидратация, дегидратация, жизнеобеспечивающие органы

Вместо предисловия. Республиканский (Армянский) спелеотерапевтический центр – это рукотворная пещера-здравница, выстроенная в пластах каменной пищевой соли на глубине 235 метров от поверхности почвы в местечке древнеармянского поселения Ариндж, что на окраине города Еревана. Здравница построена по специальному проекту ВНИИ Галургии Ленинграда, в пределах горного отвода соледобывающей шахты Аванского солекомбината...

Анестезиологическая защита миокарда при операциях аортокоронарного шунтирования(обзор литературы)

Ключевые слова: ишемия миокарда, защита миокарда, аортокоронарное шунтирование

Неадекватная защита миокарда, особенно у больных высокой группы риска (повторное аортокоронарное шунтирование (АКШ), нестабильная стенокардия, дисфункция левого желудочка, сахарный диабет, преклонный возраст и т.д.), приводит к возникновению таких послеоперационных осложнений, как низкий сердечный выброс, периоперативный инфаркт миокарда, острая сердечная недостаточность, требующих пролонгированной интенсивной терапии...

Основные этиологические факторы неязвенной диспепсии

Ключевые слова: неязвенная диспепсия, диагностика

Термин диспепсия происходит от греческих слов dys (нарушение, расстройство) и pepsis (пищеварение). Диспепсия характеризуется болями в верхней половине живота, чувством дискомфорта, быстрым насыщением, вздутием живота после приема пищи, тошнотой, рвотой. Наиболее общими органическими расстройствами, вызывающими диспепсию, являются язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, желудочно-пищеводный рефлюкс, хронический холецистит, хронический панкреатит, рак желудка...

Состояние системы интерферона-гамма – секреция и клетки-продуценты у больных со злокачественными опухолями легкого

Ключевые слова: интерферона-гамма, цитокинотерапия

Введение. Изучение цитокиновой регуляции является одним из новых перспективных направлений в иммунологии опухолей [1]. Цитокины как медиаторы развития всех этапов иммунных реакций обуславливают пролиферацию и дифференциацию различных типов клеток иммунной системы [2–4], а рекомбинантные препараты их широко применяются в клинике онкологических заболеваний для моно- и адъювантной терапии [5–8]...

Опыт комбинированного лечения осложненного рака ободочной кишки

Ключевые слова: колоректальный рак, полихимиотерапия, радикальная операция

Частота заболеваемости колоректальным раком существенно возросла за последние годы и не имеет тенденции к снижению [1,2,4]. По данным ВОЗ, в мире ежегодно регистрируется более 500 000 случаев колоректального рака [5].Причем лишь у 20,5% больных раком ободочной кишки при первом обращении устанавливается I-II стадии заболевания, у остальных выявляются III-IV стадии, среди которых продолжает расти число таких осложнений, как кишечная непроходимость...

Современные методы хирургического лечения аноректальных атрезий

Ключевые слова: аноректальные атрезии, врожденные дефекты, проктопластика, пороки аноректальной области, врожденная клоака

Неперфорированный анус (атрезия ануса) был хорошо известен и распознавался еще в древние времена (213), когда греки, арабы, римляне, зная о возможности отсутствия анального отверстия, объясняли это мистически. Первая попытка оказать помощь ребенку с атрезией заднего прохода была осуществлена в VII веке н. э. Византийский врач PaulusAegineta рекомендовал хирургическое лечение этих аномалий [цит. по 7]...

Опыт применения пищевой добавки Йонг Ганг (Yong Gang) в практике лечения сексуальных расстройств у пациентов с акцентуациями характера астенического круга

Ключевые слова: Yong Gang, акцентуация характера, преждевременная эякуляция, эректильная дисфункция, сексуальные расстройства

Цель и задачи исследования. Половая жизнь является неотъемлемым компонентом общего здоровья и благополучия человека, а нарушения сексуальной функции являются медицинской и социальной проблемой.

Сексуальные проявления человека обусловлены прежде всего степень‏ю зрелости личности, и незрелость или аномалии структуры личности являются одним из ведущих факторов, модифицирующих все проявления сексуальности...

Применение легких ортопедических аппаратов внешней фиксации позвоночника для профилактики и лечения начальных форм остеопороза

Ключевые слова: остеопороз, остеопороз позвоночника, ортопедические аппараты

Остеопороз – заболевание, которое характеризуется низкой костной массой и нарушениями архитектоники костной ткани с последующим увеличением хрупкости кости.

Всемирная организация здравоохранения ставит проблему остеопороза на 4-е место после сердечно-сосудистых, онкологических, заболеваний и диабета...

Травматология и ортопедия
Корригирующая тройная остеотомия таза в сочетании с варизирующей деторсионной остеотомией проксимального отдела бедренной кости как метод выбора при выраженных диспластических коксартрозах у лиц юношеского и молодого возраста

Ключевые слова: дисплазия, таз, корригирующая остеотомия

Данный метод был предложен для лечения выраженной дисплазии ТБС у лиц молодого возраста. Поскольку остеотомии по Solter, Chiary, Pemberton показаны в более раннем возрасте, то после окончательного завершения костного роста и его структуральной организации метод корригирующей тройной остеотомии таза фактически остается единственным (метод выбора) для устранения выраженной дисплазии вертлужной впадины...

Травматология и ортопедия
Реконструкция переломов ветлужной впадины илиоингвинальным доступом

Ключевые слова: реконструкция переломов, вертлужная впадина, остеосинтез, подвздошно-паховый доступ

Переломы костей таза составляют всего 3% всех повреждений скелета, но по количеству сопутствующих повреждений и смертности уступают только переломам костей черепа [10]. Уровень смертности при переломах костей таза составляет 5–20%, из которых 4% – за счет внутритазового кровотечения [2,10]. Кроме того, переломы костей таза отличаются своей сложностью и многообразием, что нашло отражение в общеизвестных классификациях (AO, Key и Conwell, Dunn и Morris, Furey и т.д.)...

Травматология и ортопедия
Новые стержневые аппараты для чрескостного остеосинтеза

Ключевые слова: стержневой аппарат, остеосинтез, лечение

Введение. В современной травматологии и ортопедии при лечении переломов и заболеваний костей стал широко применяться метод чрескостного остеосинтеза с использованием аппаратов внешней фиксации. Данный метод лечения, как наиболее оптимальный и атравматичный, стал занимать большое место в клинической практике, и вскоре в травматологии и ортопедии выделилось отдельное направление лечения – аппаратное...

Травматология и ортопедия
Стабильно-функциональный остеосинтез диафизов длинных костей нижних конечностей – ошибки и осложнения

Ключевые слова: диафизарные переломы, нижние конечности, стабильно-функциональный остеосинтез, осложнения остеосинтеза, нарушение остеогенеза

Введение. Выбор метода лечения диафизарных переломов длинных костей нижних конечностей является одной из актуальных проблем современной травматологии. Актуальность обусловлена как частотой данных повреждений, доходящих до 40% травм опорно-двигательного аппарата [7], так и большим процентом осложнений и неудовлетворительных исходов лечения вышеуказанных повреждений...

Травматология и ортопедия
Некоторые аспекты огнестрельных ранений при локальных военных конфликтах

Ключевые слова: раневая инфекция, огнестрельная рана, микроорганизм, антибиотики

К настоящему времени проблема раневой инфекции при локальных военных конфликтах продолжает оставаться наиболее сложным вопросам военно-полевой хирургии. По некоторым данным (Брюсов П.Г., Хрупкин В.И., 1996; Брюсов П.Г., Начаев Э.А., 1996), в локальных военных конфликтах последних лет гнойные осложнения диагностируются у многих раненых и выступают как причина их смерти...

Травматология и ортопедия

САМЫЕ ЧИТАЕМЫЕ СТАТЬИ